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  • 细胞的接种密度为多少合适?

    依照细胞株基本数据上的接种密度或稀释分盘的比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长的重要原因之一。


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  • 如何避免细胞污染

    主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染的血清和污染的细胞等。严格无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好的细胞来源和培养基配制是减低污染的最好方法。 如果细胞发生微生物污染,加入相应抗生素,直接灭菌后丢弃。


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  • 冷冻保存细胞的方法?

    冷冻管置于 4 3060 分钟 →(-20 30 分钟)→ -80 1618 小时(或隔夜)→ 液氮罐 长期储存。


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  • 悬浮性细胞应如何继代处理?

    一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,可将培养角瓶口端稍微抬高,直到无法容纳为止,分瓶时取出一部分含细胞的培养液至另一新的培养角瓶,加入新鲜培养基稀释至适当浓度。


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  • 培养基中是否须添加抗生素?

    除于特殊筛选系统中外,一般正常培养状态下,培养基中不应添加任何抗生素。


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  • 何时须更换培养基?

    视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本数据上的更换时间,按时更换培养基即可。


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  • 可否使用与原先培养条件不同的培养基?

    不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应的细胞培养基,若骤然使用和原先提供培养条件不同的培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活。


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  • 细胞冷冻管解冻培养时,是否应马上去除 DMSO?

    除少数特别注明对 DMSO 敏感的细胞外,绝大部分细胞株(包括悬浮性细胞),在解冻之后,应直接放入含有 1015 ml 新鲜培养基的培养角瓶中,待隔天再置换新鲜培养基以去除 DMSO 即可


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  • 冷冻管应如何解冻?

    取出冷冻管后,须立即放入 37 ℃ 水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在 1 分钟内全部融化,并注意水面不可超过冷冻管盖沿,否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时,注意冷冻管上层是否有液体流动,有则静置放在桌面等液体挥发再解冻,必须注意安全,预防冷冻管的爆裂。


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  • 血清中的沉淀是污染吗?

    将血清放入4℃冰箱静止一段时间后,上清是清澈透亮的则不属于污染,反之始终有一定的浑浊,两者对比更加明显。


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